技术文章您的位置:网站首页 >技术文章>液相色谱仪测定番石榴叶中游离鞣花酸
液相色谱仪测定番石榴叶中游离鞣花酸
更新时间:2019-07-30   点击次数:1138次

本实验利用液相色谱法对番石榴叶粉中鞣花酸的含量进行测定,为更广泛地开展番石榴叶开发利用提供理论和。

1材料与方法

1.1材料与试剂

番石榴叶片,鞣花酸标准品美国Fluka公司;甲醇(色谱纯);甲醇、盐酸(均为分析纯)

1.2仪器与设备

LC-20AD液相色谱仪(SPD-20A紫外检测器、SIL-20A自动进样器及CTO-10A柱温箱)日本岛津公司;Universal32R高速台式冷冻离心机德国Hettich公司;Elix5超纯水仪美国Millipore公司。

1.3标准溶液的配制

准确称取鞣花酸标准品40mg,转移至100mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,得到质量浓度均为400mg/L的混标溶液,随后逐级稀释至0.515102050100200mg/L

1.4色谱分析条件

色谱柱为IntersilODS-SP色谱柱(250mm×4.5mm5μm),柱温35°C,流动相为3%冰乙酸(A)-甲醇(B),梯度洗脱程序:04minB20%升至45%,保持6min1015minB45%升至70%1520min升至100%,保持1min;进样体积10μL

1.5样品处理

将所摘取的新鲜番石榴叶片分老叶、嫩叶、成熟叶,于105°C烘至质量恒定,用粉碎机打成粉,分别准确称取1.0g粉末,放入100mL单颈瓶中,加入甲醇(0.01%HCl)30mL,于70°C搅拌回流,2h后取出冷却,用Whatman4号滤纸过滤,即得番石榴叶片粗提取液,置4°C冰箱备用。每个样品设3次重复。

2结果与分析

2.1标准曲线的制作

取各级标准溶液,进样10μL,所得的色谱图叠加如图1所示,以标样质量浓度Y/(mg/mL)为纵坐标、标样峰面积X/mV为横坐标,绘制标准溶液曲线,计算线性回归方程为Y=108711X45231,线性范围为0.5200mg/L,相关系数为0.9998

1.png

2.2精密度实验

将同一番石榴叶提取液样品(样品代号2010.6.25)分装于10个样品瓶中,在同一天内重复进样5次,测定峰面积,并计算相对标准偏差(RSD)来考查其测定的精密度,得出峰面积的RSD0.6%,保留时间的RSD0.06%。同时将该批样品连续测定5d,得出峰面积的RSD1.13%,说明精密度良好。

2.3回收率实验

采用加标样回收法,称取番石榴叶3份,每份样量1.0g,分别加入1000μg/mL的鞣花酸标准溶液0.51mL,其他均按1.5节方法进行,平行测定3次,计算回收率(回收率为用添加标样样品的测出量减去样品测出量,再除以加入的标样量,乘以100%),结果见表3。结果表明平均回收率为95.86%98.31%

2.png

2.4样品分析

2.4.1色谱分离效果

按照上述色谱条件,将嫩叶、成熟叶、老叶各样品进样10.0μL进行液相色谱分析,所得样品色谱图见图2,与标准色谱图(1)比较,可确定峰1为鞣花酸,峰1与前后相邻两峰之间的分离度均大于1.5,说明该梯度洗脱方法可以成功地分离鞣花酸和其他组分。

3.png

 

2.  4.2番石榴叶片中游离鞣花酸含量

从表2可看出,番石榴叶片中游离鞣花酸含量以幼嫩叶居多,成熟叶次之,而老叶中不含鞣花酸。

4.png

3讨论

番石榴叶提取物,必须采用梯度洗脱方法才能有效地分离鞣花酸和其他组分。

网站首页 关于我们 新闻中心 产品中心 联系我们
备案号:沪ICP备15056113号-1   GoogleSitemap   技术支持:化工仪器网 管理登陆
© 2018 上海莱睿科学仪器有限公司(www.lairuisci.com) 版权所有 总访问量:527100
主营: tomy高压灭菌锅,tomy高压灭菌器,thermo红外光谱仪,尼高力红外光谱仪,ika磁力搅拌器