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关于Waters 凝胶色谱仪GPC凝胶渗透色谱法
更新时间:2019-10-16   点击次数:1249次
  Waters凝胶色谱仪GPC主要由输液系统(柱塞泵)、进样器、色谱柱、检测系统(示差折光检测器、多波长UV、FTIR等)及数据采集与处理系统。
  凝胶渗透色谱法(GPC),即尺寸排阻色谱法(SEC),或凝胶过滤色谱(GFC)法,是一种色谱技术,通过使溶解的分子经过含有微孔填料的色谱柱,从而依据其大小进行分离。
  当样品被分离并从色谱柱洗脱时,可通过单的浓度检测器(传统校正)或一系列检测器(普适校正及三重检测)进行表征。GPC技术用于表征天然及合成聚合物、生物聚合物、蛋白质或纳米颗粒。
  当GPC色谱分离与光散射、粘度计以及浓度检测器相结合(三重检测)时,可提供分子量分布、分子大小、特性粘度以及大分子结构、构型聚集与支化方面的信息。
  根据所需凝胶体积,估计所需干胶的量。一般葡聚糖凝胶吸水后的凝胶体积约为其吸水量的2倍,例SephadexG-20的吸水量为20,1克SephadexG─200吸水后形成的凝胶体积约40ml。凝胶的粒度也可影响层析分离效果。粒度细胞分离效果好,但阻力大,流速慢。一般实验室分离蛋白质采用100-200号筛目的的SephadexG-200效果好,脱盐用SephadexG-25、G-50,用粗粒,短柱,流速快。
  对载体的要求:
  1.良好的化学稳定性和热稳定性;
  2.有一定的机械强度;
  3.不易变形;
  4.流动阻力小;
  5.对试样没有吸附作用;
  6.分离范围越大越好(取决于孔径分布)等;
  7.载体的粒度愈小,愈均匀,堆积的愈紧密,色谱柱分离效率愈高。
  GPC载体的种类:
  1.交联聚苯乙烯凝胶
  2.多孔性玻璃
  3.聚乙酸乙烯酯凝胶及聚丙烯酰胺凝胶
  4.木质素凝胶等
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