液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，简称HPLC）又叫做高压或高速液相色谱、高分离度液相色谱或近代柱色谱,以液体为流动相，采用高压输液系统，是色谱法的一个重要分支。液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送(zui高输送压力可达4.9´107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。

大豆黄卷为豆科植物大豆的种子发芽后晒干而成。对肺炎球菌、金黄色葡萄球菌等均有抑制作用。抗病毒作用：用于病毒性感冒、流感。具有清热透表；除湿利气的功效。

　　本品为豆科植物大豆Glycine max(L.)Merr.的成熟种子发芽干燥而得。大豆用水浸泡至膨胀，将水放出，用湿布覆盖，每日用清水冲洗一次或喷淋二次，待芽长至0.5cm～1cm时，取出，干燥。

　　「性状」 本品略呈肾形，长约8mm，宽约6mm。表面黄色或黄棕色，微皱缩，一侧有明显的脐点，一端有1弯曲胚根。外皮质脆，多破裂或脱落。子叶2片，黄色。气微，味淡，嚼之有豆腥味。以粒大、饱满者为佳。

　　「鉴别」 (1)取本品粉末1g，加稀乙醇30ml，超声处理30分钟，离心(3000转/分钟)10分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加稀乙醇1ml使溶解，取上清液， 作为供试品溶液。另取亮氨酸对照品，加稀乙醇制成每1ml 含0.5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验，吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(19：5：5)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液， 在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

　　(2)取本品粉末2g，加80%乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加80%乙醇1ml使溶解，取上清液，作为供试品溶液。另取染 料木苷对照品，加80%乙醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液5～10μl、对照品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-水(10：1.7：1.3)为展开剂，展开缸 中预饱和30分钟，展开，取出，晾干，喷以2%三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

　　「检查」水分 不得过11.0%(附录Ⅸ H)。

　　总灰分 不得过7.0％(附录Ⅸ K)

　　「含量测定」 照液相色谱法测定。

　　色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，以1%醋酸溶液为流动相B，按下表进行梯度洗脱；柱温35℃；检测波长为260nm。理论板数按大豆苷、染料木苷峰计算均不得低于5000。

　　时间(分钟) A(%) B(%)

　　0～25

　　25～33 28

　　28→45 72

　　72→55对照品溶液的制备 取大豆苷、染料木苷对照品各约10mg，精密称定，置50ml量瓶中，加70%甲醇至刻度，摇匀；精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。

　　供试品溶液的制备 取本品粉末(过四号筛)约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%甲醇25ml，称定重量，加热回流2小时，放冷，再称定重量，用70%甲醇补足减失的重量，摇匀，离心(2000转/分钟)10分钟，取上清液，滤过，取续滤液，即得。

　　测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

　　本品按干燥品计算，含大豆苷(C21H20O9)和染料木苷(C21H20O10)的总量不得少于0.08%。

　　「炮制」 取灯心草、淡竹叶置锅内，加入适量水煎煮二次，*次60分钟，第二次30分钟，合并煎液，滤过。滤液与大豆黄卷共置锅内，煮至药液被吸尽，取出，干燥。

　　每100kg净药材用灯心草1kg、淡竹叶2kg。

　　Syltech500型液相色谱仪(单泵配置/梯度)

　　1 泵 P501型恒流高压输液泵

　　1.1 液体输送原理：双柱塞串联往复方式，自动脉冲抑制系统，另配有溶剂压缩因子程序，能自动补偿流量，液体输送更

　　1.2 zui大输送压力：大于等于6000PSI(约42MPa以上)

　　1.3 流速精度：0.1%

　　1.4 流速范围：(0.001-10.000)mL/minzui小增量0.001mL/min

　　1.5 柱塞杆清洗：不需另配设备即可自动柱塞杆清洗，保护柱塞杆

　　1.6 安全性：配有开机自检，高低压报警和保护功能

　　1.7 梯度系统：二元梯度混合系统/单泵系统
       

　　2 紫外检测器UV501型紫外可变波长检测器
     

　　3 色谱柱：VertexTMXB-C18 4.6*250mm*5um 液相色谱柱、配保护柱

　　4 柱温箱：室温上10度到100度(0.1度增量)

　　5 N2010药典版色谱工作站：色谱工作站(满足2010版药典要求，美国制作)中英文操作软件，支持WIN9X/XP/2000/2003等操作系统，硬件嵌入检测器，数字信号直接采集处理

　　6 Vertex7825i手动进样阀：Vertex7825i手动进样阀(带远程触发开关)，自带20UL定量，耐压8000psi，进样次数超1万次以上