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色谱柱清洗方法
更新时间:2017-08-18   点击次数:2117次

吸附的主要原因

  反相硅胶柱填充介质(固定相)与样品间常常会发生下列吸附现象:

  (1)    残存硅醇基与碱性物质间的离子吸附;(2) 硅胶表面的金属杂质与金属配位物质间的吸附;

  (3)    疏水性*的物质在柱中的蓄积。以上现象,会引起反相色谱柱柱效下降、拖尾、重复性不良等状况的发生

  清洗方法

  1、疏水性物质的去除:使用有机溶剂(乙腈、甲醇、乙腈与THF的混合溶剂)进行清洗。 考虑样品成分对于有机溶剂的溶解性,选用比淋洗液浓度高的有机溶剂、或选用极性较低的有机溶剂进行过柱清洗。这种情况下,有必要注意淋洗液中盐的析出现象。

  2、碱性物质(金属配位物质)的去除:使用酸性水溶液与有机溶剂的混合液(0.1%磷酸、0.1%TFA/乙腈、甲醇的混合液)进行过柱清洗。

  *一般来说,清洗时间可选择为过柱5-10个柱体积便可。

  在附吸成分其吸附力*时,即使进行过清洗,柱性能也有可能得

  不到恢复。另外,请充分考虑淋洗液的pH值,以避免损坏色谱柱。

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