高压灭菌器可能无法用无菌过滤的空气取代蒸汽，但对于密封的培养瓶，这不会产生问题，而对于非密封的瓶子或培养基，非无菌空气将导致培养基的污染。此外，低于规定时间的高压灭菌还会引起杂菌生长并导致假阳性结果。工作量大时，这些问题在实验室可能更为普遍。

 

　　高压灭菌器通常是利用饱和蒸汽对医疗器械、敷料、药液、玻璃器皿等进行消毒灭菌的设备.适用于医疗、印染、科研、食品、保健站等单位使用，是理想的灭菌设备。

 

　　高压灭菌器使用方法：

 

　　1．先将内层灭菌桶取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。

 

　　2．放回灭菌桶，并装入待灭菌物品。注意不要装得太挤，以免防碍蒸汽流通而影响灭菌效果。三角烧瓶与试管口端均不要与桶壁接触，以免冷凝水淋湿包口的纸而透入棉塞。

 

　　3．加盖，并将盖上的排气软管插入内层灭菌桶的排气槽内。再以两两对称的方式同时旋紧相对的两个螺栓，使螺栓松紧一致，勿使漏气。

 

　　4．用电炉或煤气加热，并同时打开排气阀，使水沸腾以排除锅内的冷空气。待冷空气*排尽后，关上排气阀，让锅内的温度随蒸汽压力增加而逐渐上升。当锅内压力升到所需压力时，控制热源，维持压力至所需时间。本实验用1．05kg/cm2，121．3℃，20分钟灭菌。

 

　　5．灭菌所需时间到后，切断电源或关闭煤气，让灭菌锅内温度自然下降，当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓，打开盖子，取出灭菌物品。如果压力未降到0时，打开排气阀，就会因锅内压力突然下降，使容器内的培养基由于内外压力不平衡而冲出烧瓶口或试管口，造成棉塞沾染培养基而发生污染。

 

　　6．将取出的灭菌培养基放入37℃温箱培养24小时，经检查若无杂菌生长，即可待用。不过有几点要注意的：1.锅内必须要有充足的水。2.锅的气密性一定要很好。3.使用完后一定要放到适合温度才可以打开。