1 仪器与试药

Agilent气相色谱仪 。L － 阿拉伯糖醇( CAT． NO． 1042102 USP ROCKVILLE，MD LOT FOE311; 纯度: 100%) ，半乳糖醇( CAT． NO． 1287711 USP ROCKVILLE，MD LOT F0D376;纯度: 99%) ，甘露醇(纯度:99. 6%)和山梨醇( CAT． NO． 1617000 USP ROCKVILLE，MD LOT H2F247; 纯度: 98. 7%) 。木糖醇氯化钠注射液样品9批均由厂家提供，: 10050601， 10050602， 10050603，10050604， 10050605， 10050606， 10050607，10050608，10050609。

2 溶液的配制

2. 1 对照品溶液

分别精密称取L － 阿拉伯糖醇，半乳糖醇，甘露醇和山梨醇10 mg，置100 mL 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，再精密量取5 mL 置10 mL量瓶中，加水稀释至刻度。

2. 2 内标溶液

以赤藻糖醇作为内标物质，精密称取赤藻糖醇( CAT． NO． 1241903 USP ROCKVILLE，MD LOT F1F295; 纯度: 99. 9%) 35 mg，置10mL 量瓶中，加水溶解并稀释至刻度。再精密量取1. 5 mL 置100 mL 量瓶中，加水稀释至刻度。

2. 3 供试品溶液

配制成10 mg·mL － 1 的样品溶液。精密量取5 mL 置25 mL 量瓶中( 规格为12. 5 g:250 mL) ，加水稀释至刻度。

2. 4 测定法

分别精密量取对照品溶液和供试品溶液1. 0 mL 置不同圆底烧瓶中，每个圆底烧瓶中再分别精密加入内标溶液1. 0 mL。在60℃水浴中旋转蒸干; 再加入无水乙醇1 mL，振摇使溶解，在60℃水浴中旋转蒸干; 再加入吡啶1 mL 使残渣溶解，加入醋酐1 mL，盖紧盖子，涡旋混合30 s; 70℃干燥箱中放置30 min。取出，放冷，精密量取1μL 进样。

3 色谱条件

色谱柱固定相为14%氰丙基苯基－ 94%二甲基聚硅氧烷的DB － 1701 毛细管柱( 30 m × 0. 32 mm ×0. 25μm) ; 检测器FID，检测器温度250℃; 柱温采用程序升温，起始温度为170℃，维持5 min，以每分钟3℃的速率升至210℃，维持10 min，以每分钟30℃的速率升至240℃，维持10 min; 进样口温度为240℃; 载气: N2; 流速2 mL·min －1; 分流比5∶ 1; 进样量: 1 μL。各色谱峰的分离度应大于1. 5。赤藻糖醇，L － 阿拉伯糖醇，木糖醇，甘露醇，半乳糖醇和山梨醇的相对保留时间依次为: 0. 33， 0. 63， 0. 94， 0. 98， 1. 0。记录色谱图，按内标法计算。在上述色谱条件下，对照品和样品的色谱图见图1。

4 方法学考察

4. 1 精密度试验

分别精密量取对照品溶液1. 0 mL和内标溶液1. 0 mL 置同一圆底烧瓶中，其它操作同“2. 4”项。连续进样6 针，计算L － 阿拉伯糖醇，木糖醇，甘露醇，半乳糖醇和山梨醇的RSD( A对照/A内标) 分别为0. 4%， 0. 7%， 1. 3%， 1. 6%， 1. 2%。4. 2 线性考察分别精密吸取L － 阿拉伯糖醇，甘露醇，半乳糖醇和山梨醇各3，2，1， 0. 8， 0. 5mL 置圆底烧瓶中，在每个烧瓶中加入内标溶液1 mL，以峰面积A 为纵坐标，以样品浓度C( mg·mL － 1 ) 为横坐标分别绘制标准曲线，L － 阿拉伯糖醇、甘露醇、半乳糖醇、山梨醇的线性方程分别为:

A = 335. 859C + 0. 0039 r = 0. 9998;

A = 336. 532C + 0. 0339 r = 0. 9998;

A = 37. 728C － 0. 0453 r = 0. 9999;

A = 36. 416C － 0. 001 r = 0. 9991

结果表明L － 阿拉伯糖醇在0. 01278 ～0. 07672 mg·mL － 1 ，甘露醇在0. 0123 ～0. 0738 mg · mL － 1，半乳糖醇在0. 01492 ～0. 08955 mg · mL － 1 ，山梨醇在0. 01336 ～0. 08015 mg·mL － 1 范围内具有良好的线性关系。

4. 3 检出限和定量限

当信噪比S /N = 10 时，L －阿拉伯糖醇，甘露醇，半乳糖醇和山梨醇的定量限分别为2. 56， 2. 46， 2. 98 和2. 67 μg; 按信噪比S /N = 3计算，zui低检出量依次为0. 78，0. 74，0. 89 和0. 80 μg。4. 4 稳定性试验取同一供试品溶液，分别在0，2，4，8， 12， 24 h按上述色谱条件测定，结果表明，供试品溶液在24 h 内稳定。

4. 5 重复性试验分别精密量取对照品溶液

1. 0 mL和内标溶液1. 0 mL 置同一圆底烧瓶中，平行制备6 份，其它操作同“2. 4”项。在上述色谱条件下记录各色谱峰峰面积，计算L － 阿拉伯糖醇，半乳糖醇，甘露醇和山梨醇峰面积的RSD ( A对照/A内标) 依次为0. 2%，0. 5%，0. 8%，1. 2%，1. 2%。

说明衍生化反应的重复性良好。将同一批木糖醇氯化钠注射液( 批号10050606) 按上述方法制备6 份，在上述色谱条件下分析，计算L － 阿拉伯糖醇，半乳糖醇，甘露醇和山梨醇含量的平均值分别为0. 04%，0，0，0; RSD 分别为0. 1%，0，0，0

。

4. 6 回收率

精密量取木糖醇氯化钠注射液( 批号10050606) 5 mL 置25 mL 量瓶中，加水稀释至刻度，即得供试品溶液。精密量取供试品溶液1 mL置一圆底烧瓶中，再分别加入对照品溶液和内标溶液1，0. 8，0. 5 mL，其它操作同“2. 4”项。计算L － 阿拉伯糖醇，半乳糖醇，甘露醇和山梨醇的回收率，见表1。

5 样品的测定

对9 批样品，按“2”项下方法制备对照品溶液、内标溶液和供试品溶液，依法测定，结果见表2。

6 讨论

6. 1 色谱条件的考察

本研究考察了DB － 1701，DB － 624，HP － 5 3 根不同型号的石英毛细管柱，结果表明DB － 1701 石英毛细管柱能够将待测组分实现良好的分离。本试验曾尝试以起始温度为100℃，发现赤藻糖醇峰无法与溶剂峰分开。若每分钟3℃的速率升至215℃，维持10 min，结果发现甘露醇，半乳糖醇和山梨醇无法*分离。改用起始温度为170℃，维持5 min，以每分钟3℃的速率升至210℃，维持10 min，以每分钟30℃的速率升至240℃，维持10 min 后，各待测组分分离良好。

6. 2 提取条件的考察

本研究开始未用无水乙醇对样品进行旋转蒸干，发现色谱峰拖尾严重，故样品处理分为三步: 在60℃水浴中将水旋转蒸干; 加无水乙醇后在60℃水浴中将水再次旋转蒸干; 加吡啶溶解后，再加入醋酐使醇衍生化。试验发现随着醋酐加入量( 0. 1 mL ～ 1. 0 mL) 的增大，各色谱峰的峰面积增大，但醋酐量大于1. 0 mL 后，色谱峰峰面积不再增大，结果见表3。说明已衍生化*，衍生化率几近100%，故醋酐加入量为1. 0 mL。

6. 3 小结

本研究对9 批样品，采用GC 法同时对L － 阿拉伯糖醇，甘露醇，半乳糖醇和山梨醇进行了含量测定，结果表明该方法简单，准确，可靠，可更好控制该制剂的质量。