红花籽油富含不饱和脂肪酸及维生素E,其中,亚油酸含量高达73%--85%,被称为“亚油酸王”,是已知植物油中含量zui高的油脂。亚油酸 CH3(CH2)4CH=CHCH2CH=CH(CH2)7COOH,不饱和脂肪酸的一种。为以甘油酯形态构成的亚麻仁油、棉籽油之类的干性油、半干性油的主要成分。目前,亚油酸提取本文采用气相色谱法,对市售的两个品牌亚油酸含量用不同的试样方法进行了测定。国标zui低标准红花籽油中亚油酸的含量≥67.8%。其作用如下:
1. 亚油酸是细胞的组成成分,特别是参与线粒体及细胞膜磷质的合成。亚油酸缺乏可能导致线粒体肿胀,细胞膜机构、功能的改变,膜透性、脆性增加。
2. 亚油酸与脂质代谢关系密切。体内的胆固醇要与脂肪酸结合才能在体内转送进行正常代谢。亚油酸缺乏后,胆固醇转送受阻不能进行正常代谢,就会在体内沉积,zui终导致疾病。
3. 亚油酸是合成前列素的必须前提,体内缺乏亚油酸,组织形成前列素的能力就会减退。亚油酸还会对由于X射线引起的一些皮肤损伤有保护作用。
4. 红花籽油不但能够预防心脑血管疾病,还有治疗脂肪肝的奇特功效。
5. 亚油酸的另一个功效就是组成细胞膜的原材料。组成细胞膜的材料就是不饱和脂肪酸。亚油酸有强化新陈代谢,增强细胞活力的功能。
1 实验部分
1.1 试剂和仪器
1.1.1 0.4mol/L氢氧化钾—甲醇溶液:称2.24g氢氧化钾溶于少许甲醇中,然后用甲醇稀释到10ml。
1.1.2 石油醚(30~60℃沸程)和苯的混合溶剂(1:1)。
1.1.3 正己烷和乙迷的混合溶剂(2:1)
1.1.4 日本岛津GC2010plus气相色谱仪,配FID检测器,GCsolution分析软件
1.2 试样的甲酯化处理方法
1.2.1方法1:取试样30--100mg(约2-6滴)于10ml容量瓶中,加入2ml石油醚和苯的混合溶剂(1:1)使试样溶解,再加入 2ml0.4mol/L氢氧化钾—甲醇溶液,混匀,静置10min,加水定容1-2ml振摇,放置上液澄清,加水至刻度,若上液澄清浑浊,可滴加几滴无水 乙醇1-2min即可澄清,上层液即可用于气相色谱分析[1]。
1.2.2方法2:取试样30--100mg(约2-6滴)于10ml容量瓶中,加入2ml正己烷和乙迷的混合溶剂(2:1)振荡使试样溶解,再加 入2ml0.4mol/L氢氧化钾—甲醇溶液,混匀,静置10min,加水定容1-2ml振摇,放置上液澄清,加水至刻度,取上清液用于气相色谱分析。
1.3分析测定
1.3.1仪器工作条件色谱柱:分离柱采用交联TR—WAX (30m×0.25mmID×0.5mm)毛细管色谱柱;分流进样,载气:N2,线速度80cm/min;分流进样,分流比:5:95汽化室温度:230℃;柱室温度:210℃恒温;检测器:FID,230℃;进样量:1μL。
1.3.2定性和定量测定:本法采用脂肪酸甲酯标准品与试样色谱峰的保留时间进行比较定性。定量分析采用面积归一化法,在色谱分析软件上利用时间程序将溶剂峰的峰面积扣除,直接计算出亚油酸在脂肪酸总量中所占的重量百分比。色谱图见附图。
附图2 色谱分离图用正己烷-**(2:1)混合溶剂溶液红花油a
2 气相色谱仪测定红花籽油中亚油酸结果与讨论
2.1 对市售2种红花籽油中的亚油酸的含量进行测定,结果见附表1。
附表1 红花籽油中亚油酸含量测定结果及方法变异系数
样品 | 塔原红花红花籽油 | 塔缘红花籽油 | ||||
方法 | 石油醚—苯(1:1) | 正己烷—**(2:1) | 国标推荐方法 | 石油醚—苯(1:1) | 正己烷—**(2:1) | 国标推荐方法 |
测定结果(%) | 79.122 | 79.119 | 78.452 | 81.656 | 81.766 | 80.864 |
79.152 | 79.242 | 78.412 | 81.654 | 81.745 | 80.541 | |
79.194 | 79.214 | 78.399 | 81.542 | 81.542 | 80.654 | |
79.154 | 79.22 | 78.421 | 81.948 | 81.528 | 80.421 | |
79.191 | 79.201 | 78.433 | 81.654 | 81.354 | 80.547 | |
平均值 | 79.163 | 79.199 | 78.423 | 81.691 | 81.587 | 80.605 |
标准偏差 | 0.03 | 0.047 | 0.02 | 0.152 | 0.171 | 0.166 |
变异系数 | 0.04% | 0.06% | 0.03% | 0.19% | 0.21% | 0.21% |
由附表1中实验数据可见方法1和方法2与国家标推荐方法结果差异不大,变异系数均<5%,且同一样品用以上三种方法酯化,反复试验,变异系数均<5%
2.2由于有机酸一般极性性较强,亚油酸含碳高,沸点高,所对它们必须甲酯化转化成相应的酯,以增加其挥发性,才可进行色谱分析。本文采用的石油醚 —苯(1:1)氢氧化钾—甲醇室温酯化法和正己烷—**(2:1) 氢氧化钾—甲醇室温酯化法,测定结果差异不大,与国家标推荐方法比较zui大优点是简便、快速、结果准确、稳定性较好。
2.3本文采用的石油醚—苯(1:1)氢氧化钾—甲醇室温酯化法和正己烷—**(2:1) 氢氧化钾—甲醇室温酯化法,测定结果比国家标推荐方法结果偏大的原因可能是某些脂肪酸未*酯化而导致的,但不影响zui终结果的报出。