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液相色谱仪HPLC测定诺氟沙星
更新时间:2017-05-03   点击次数:1505次

一、前言:诺氟沙星(Norfloxacin,又名NoroxinFulgram),别名:力醇罗、氟哌酸、淋克星。其化学名为1-乙基-6--1,4-二氢-4-氧代-7-(1-嗪基)-3-喹啉羧酸。本品为第三代喹诺酮类抗菌药,会阻碍消化道内致病细菌的DNA旋转酶(DNA Gyrase)的作用,阻碍细菌DNA复制,对细菌有抑制作用。是治疗肠炎痢疾的常用药。但此药对未成年人骨骼形成有延缓作用,会影响到发育。故禁止未成年人服用。本文主要采用液相色谱法测定诺氟沙星(C16H18FN3O3)的含量。 该方法适用于诺氟沙星。

原理: 供试品制成流动相溶液,进入液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长278nm处检测诺氟沙星吸收值,计算出其含量。

二、实验

试剂: 1.0.025mol/L磷酸溶液(用三乙胺调节pH值至3.0±0.1) 2.乙腈 3.三乙胺

仪器设备:

1.仪器

1.1液相色谱仪

1.2色谱柱 十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,理论塔板数按环丙沙星峰计算不低于2000,诺氟沙星峰与相邻杂质峰间的分离度应符合要求。

 1.3紫外吸收检测器

2.色谱条件

2.1流动相:0.025mol/L磷酸溶液乙腈=8713.

2.2检测波长:278nm

2.3柱温:室温

试样制备:

1.称取供试品 精密称取该品25mg,置100mL量瓶中。

2.对照品溶液的制备 精密称取适量,加流动相溶液溶解并制成每1mL25μg的溶液,摇匀,即得。

3.供试品溶液的制备 将供试品加0.1mol/L盐酸溶液2mL使溶解后,加水稀释至刻度,摇匀,精密量取5mL,置50mL量瓶中,加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。 (注:精密称取系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。精密量取系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。)

操作步骤: 分别精密吸取上述对照品溶液与供试品溶液各20μL注入液相色谱仪,用紫外吸收检测器,于波长278nm处测定环丙沙星的吸收值,计算出其含量。

 

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