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安捷伦液相色谱仪HPLC分析六味地黄丸含量
更新时间:2017-09-29   点击次数:1429次

 安捷伦液相色谱仪HPLC分析六味地黄丸含量

六味地黄丸,滋阴补肾。用于肾阴亏损,头晕耳鸣,腰膝酸软,骨蒸潮热,盗汗遗精。主要成分为熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻。

 

有关六味地黄丸制剂的各成分的含量测定方法如下:

一、山茱萸:

色谱条件与系统适用性试验:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1:8:4:87)为流动相;检测波长为236nm,柱温40℃。理论板数按马钱苷峰计应不低于4000。

供试品溶液的制备:取本品水蜜丸或小蜜丸,切碎,取约0.7g,精密称定;或取重量差异检查项下的大蜜丸,剪碎,取约0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,称定重量,超声提取(功率250W,频率33kHZ)15分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重 量,摇匀,滤过。精密量取续滤液10ml,置中性氧化铝柱(100~200目,4g,内径1cm,干法装柱)上,用40%甲醇适量使溶解,并转移至 10ml量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。

二、牡丹皮

色谱条件与系统适用性试验:以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以甲醇-水(70:30)为流动相;检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计应不低于3500。

供试品溶液的制备:取本品水蜜丸或小蜜丸,切碎,取约0.3g,精密称定;或取重量差异检查项下的大蜜丸,剪碎,取约0.4g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入50%甲醇50ml,密塞,称定重量,超声提取(功率250W,频率33kHZ)45分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重 量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

三、单皮酚

Waters2695液相色谱仪;色谱柱为HypersilODS2柱(205mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇 -2%冰醋酸(55:45);流速为1.0mL/min;检测波长为275nm;柱温25℃。样品用甲醇超声提取后经Sep-PakC18微柱处理,收集 第12~14mL流出液。

 

四、墩果酸、熊果酸

Agilent液相色谱仪1200;色谱柱为Shim-PackC18分析柱 4.6mm×150mm,5μm;流动相为乙腈-甲醇-水-乙酸胺70:16:14:0.5;流速1mL/min;检测波长215nm;柱温为室温。样品 处理方法:六味地黄丸(浓缩丸)用水溶解并过滤后,用乙迷加热回流提取,残渣用石油醚(30~60℃)浸泡,弃去石油醚液,残渣用甲醇溶解并定容。


 

五、马钱素

Waters510液相色谱仪;色谱柱为YWG-C18柱(150mm×4.6mm,5μm);流动相为甲醇-水(1:4);流速为0.8mL/min;检测波长为238nm。样品用甲醇超声提取。

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